Cancro de células escamosas bucais de camundongos moc1/moc2/fêmea

Informações básicas

Nome da célula：Cancro de células escamosas bucais de camundongos moc1/moc2

Linhas celulares：C57BL/6 Cxcr3-/-

Fonte celular：no exterior

Identificação celular：Certificação STR aprovada

Forma celular：Linfoma poligonal, adesivo + crescimento em suspensão

mídia de cultivo：DMEM (contendo NaHCO3 1,5 g / L) (BasMed-AW-013) + FBS 10% + P / S1% 500 ml de meio: IMDM: F10 / F12 = 2: 1313 ml: 157 ml de meio + FBS 10% (50 ml) + 2,5 mg / 500 ml de insulina + 20 ug / 500 ml + 2,5 ug / 500 ml de EGF + P / S 1% anti-duplo, 1%.

Condições de cultivo：Fase gás: ar, 95%; CO2, 5%. Temperatura: 37 graus Celsius, umidade da bacia de cultivo de 70% -80%

Fundo celular：O câncer de células escamosas bucais (OSCC) é um subconjunto proeminente do câncer da cabeça e do pescoço, com os seis principais cânceres comuns. O principal fator de risco para a ocorrência de OSCC é a exposição a carcinógenos, o que distingue este subgrupo de câncer de cabeça e pescoço do câncer de cabeça e pescoço induzido por um vírus humano. Apesar dos avanços na detecção, cirurgia, quimioterapia e radioterapia, o pronóstico da OSCC permaneceu estável durante décadas. Além disso, no momento do diagnóstico, cerca de dois terços dos pacientes com OSCC sofrem de doença em estágio avançado local, resultando em aumento da incidência e mortalidade.

Uso celular: somente para uso científico

Atenção

A atividade celular MOC1 é particularmente alta, a velocidade de agregação de valor é muito rápida, não é recomendado que a densidade de transmissão seja muito grande, e escolha um pouco mais rara, etc. Quando a transmissão de cerca de 80% é completa, é difícil digerir, é recomendado adicionar 0,25% de EDTA para entrar depois de misturar completamente todas as células em contato, colocar no recipiente para a digestão, o tempo é de cerca de 3-4 minutos depois de tirar

No lado do recipiente de cultura para ajudar as células a cair, o processo de bate dura cerca de 2 minutos antes de perder a maioria das células, se a proporção de perda ainda não é muito, também pode ser colocado novamente no recipiente de cultura para continuar a digerir 1-2 minutos depois de tirar novamente para tirar o bate, espere que 80-90% das células caiam depois de terminar a digestão, a centrífuga suspende novamente a garrafa e se disperse uniformemente.

A adesividade celular MOC2 e a semelhança celular convencional não são particularmente fortes. O ciclo de multiplicação também não é rápido MOC1. Tratado com métodos digestivos convencionais.

Envio a temperatura normal

Depois de receber a desinfecção da garrafa T25 e colocar a caixa de cultivo em posição por 2-3 horas após observar a densidade e o estado fotografar 2-3 comentários para a venda, a densidade pode ser transmitida. A proporção de transmissão pré-geração 1: 2, etc. é recomendado congelar uma garrafa inteira em um tubo de congelamento de 1 ml, e a outra garrafa continua a transmitir, congelando repetidamente 2-3 exemplares apenas depois de ampliar para fazer experimentos, a fim de evitar que as circunstâncias súbitas causem a ruptura.

Envio de gelo secoAs células convencionais enviam 2 tubos congelados, 1 recuperação, outro de reposição, a primeira recuperação não foi bem sucedida quando estritamente de acordo com os requisitos do fabricante para recuperar o segundo, nenhum caso de sucesso da recuperação imediatamente retir a foto de recuperação para nos notificar.

Células de parede

1. Eliminar a cultura e lavar as células 1-2 vezes com PBS sem íons de cálcio e magnésio.

Adicionar 0,25% (w / v) -0,53 mM EDTA na garrafa de cultura (garrafa T25 1-2mL, garrafa T75 2-3mL), colocar em uma caixa de cultura de 37 ° C para digerir por 1-2 minutos (as células difíceis de digerir podem prolongar adequadamente o tempo de digestão), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e desmontar, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa de cultura e adicionar 3-4ml de meio contendo 10% FBS para terminar a digestão.

3. Subir suavemente, centrifugar 3-5min em 1000RPM, descartar o líquido superior, adicionar 1-2mL de líquido de cultura e soprar bem. Divida a suspensão celular na proporção 1: 2 em uma nova garrafa T25 / placa de Petri de 6 cm, adicione 6-8 ml de novo meio de cultura configurado de acordo com as instruções para manter a vitalidade do crescimento das células, e a transmissão subsequente é realizada na proporção 1: 2 ~ 1: 5 de acordo com as circunstâncias reais.

Congelação celular: após a recepção das células, é recomendado congelar um lote de sementes celulares durante a cultura das primeiras 3 gerações para uso experimental posterior.

O meio de cultura para transporte (meio de irrigação) não pode mais ser usado para cultivar células, por favor, substitua o meio de cultura recém-formulado de acordo com as condições de cultura celular do manual para cultivar células.

Células suspensas

As células que crescem em suspensão podem manter o estado de crescimento das células adicionando meio à garrafa de cultura, em geral, a densidade celular é mantida em 1 x 105 ~ 1 x 106 peças / mL (diferentes células exigem densidade diferente) para manter o crescimento normal das células. Se necessário, a garrafa pode coletar a suspensão celular em um tubo de centrifugação de 1000 rpm, centrifugar 5min, descartar a limpeza superior, adicionar 1-2mL de cultura depois de ressuspender e misturar a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 para a nova garrafa T25, adicionar 6-8ml de acordo com as instruções do novo meio de cultura configurado para manter a vitalidade do crescimento das células, a transmissão posterior é realizada de acordo com as circunstâncias reais na proporção de 1: 2 ~ 1: 4.

Segurança Biológica

Todas as células animais são consideradas potencialmente biológicamente perigosas e devem ser operadas dentro de um banco de biossegurança de nível secundário, com cuidado, todos os resíduos e utensílios que entraram em contato com a célula devem ser esterilizados antes de serem descartados.

Recomenda-se sempre usar luvas de proteção, roupas e máscaras de proteção durante a recuperação de células congeladas. Observação: O tubo de congelamento submerso em nitrogênio líquido vai vazar e vai lentamente encher o nitrogênio líquido. Quando descongelado, a fase de conversão de nitrogênio líquido em gás pode fazer com que o recipiente exploda ou sopra a tampa com força perigosa, gerando detritos volantes que causam danos pessoais.