Linha celular MOC1

Informações básicas

Nome da célula:Linha celular MOC1

Garrafa T150: 07-200-64

Garrafa T75: 10-126-37

Refrigerante: 03-374-059

Filtro 45um: 09-754-21

Linha espectral inerte: MOC1,22

Linha agressiva: MOC2

IMDM: sh30228.02 Hams

Mistura nutricional F10-F12: sh30026.01 soro bovino fetal, característica - clone marinho

Catálogo / Número de lote :sh30071.03 / AWK24001

Filtro para garrafas de filtro 1L : 09-761-108

Número de catálogo do reagente científico Insulina: I6634-50mg

Número de catálogo do reagente microporoso EMD: fator de crescimento epidérmico (EGF), recombinante humano: 01-107

Linha celular MOC1

Linhas celulares descongeladas

Antes de descongelar, adicione 21 ml de meio de linha IMDM MOC ao T150 (adicione 10 ml ao T75 se quiser descongelar)Retire o nitrogênio líquido do frasco congelado e pulverize o frasco com 70% de álcool para limpeza.

Coloque a metade inferior da garrafa congelada em um banho de água a 37 graus Celsius (não deixe a tampa entrar em contato com a água para evitar a poluição) até que haja um pequeno pedaço de gelo flutuando.

Spray a garrafa congelada novamente com ETOH e coloque-a no capô. Adicione um tubo de 1 ml de líquido de cultura a uma célula de 1 ml e adicione esses 2 ml ao T150 que já contém o meio de cultura (fazendo com que um T150 tenha um total de 22 ml).

Pegue algum meio em uma garrafa T150, enxague a garrafa congelada e, em seguida, coloque a placa plana para garantir que todas as células restantes permaneçam na garrafa congelada.

Linhas celulares congeladas
Recolha de células do T150

2. Gire em partículas em um tubo conico de 15 ml (1000 RPM x 5 minutos)

3. Eliminar o líquido superior

4. Clique em um tubo conico de 15ml para ressuspender as células

Adicionar 1,5 ml IMDM MOC linha de meio para reconstruir as células no meio - manter no gelo

Adicione lentamente 1,5 ml de mídia congelada ao introduzir gelo no tubo (para produzir mídia congelada - 20% DMSO no meio de linha IMDM MOC). Exemplo: 20 ml de estoque - adicionar 16 ml de IMDM MOC linha de meio de cultura e 4 ml de DMSO. Filtro de seringa com filtro um

7. De 1 ml a 3 garrafas congeladas por porção

Armazenar em -80 graus Celsius por não mais de 2 semanas

9. Coloque em solução de nitrogênio líquido em 1-2 semanas

Nota:Se necessário, pode ser aumentado para 2 ml de IMDM e 2 ml de meio congelado para armazenamento em 4 frascos. Além disso, é melhor contar as células e registrar em um frasco antes de congelar as células.