Kit de ELISAUsando o teste de imunoassorção ligado à centrifase de um passo de anticorpos duplos (ELISA). Para anticorpos pré-embalados por esferas (SF) embalados em microporos, adicionando amostras, produtos padrão, anticorpos de teste marcados por HRP, após lavagem térmica. Colorado com o substrato TMB, o TMB é convertido em azul sob a catalisação da peroxidase e em amarelo final sob a ação do ácido. A clareza da cor foi positivamente correlacionada com a esfera (SF) na amostra. Calcule a concentração da amostra medindo a absorção (OD) a um comprimento de onda de 450 nm com um calibrador enzimático.

Etapas de operação do kit de teste ELISA:

1. Equilíbrio de temperatura ambienteDepois de 20 minutos, retire a placa necessária do saco de folha de alumínio e coloque a placa restante em 4 ° C com um saco selhado.

2. Defina o orificio padrão e o orificio da amostra, cada orificio padrão adiciona uma concentração diferente de 50μL do produto padrão;

3. O orifício da amostra adiciona primeiro 10 μL da amostra a ser testada e depois 40 μL da diluição da amostra; Nenhum buraco em branco.

4. Além do buraco em branco, cada buraco do tipo padrão e do buraco da amostra adiciona anticorpos de detecção marcados com a peroxidase de raiz (HRP) de 100 μL, sela o buraco de reação com uma membrana de vedação, uma panela de banho de água a 37 ° C ou um termostato para 60 minutos.

5. Eliminar o líquido, secar no papel de absorção de água, preencher cada buraco com líquido de lavagem, deixar 1 min, descartar o líquido de lavagem, secar no papel de absorção de água, assim repetir a placa 5 vezes (também pode ser lavada com uma máquina de lavar placas).

Adicione 50 μL de substância A e B a cada poço e incube a luz a 37 ° C por 15 min.

Adicione 50 μL de líquido terminal a cada orifício, dentro de 15 min, para medir o valor de OD de cada orifício no comprimento de onda de 450 nm.

Tratamento e conservação do kit de teste ELISA:

Capaz de aplicarMuitos tipos de amostras de kits de teste ELISA, incluindo soro, plasma, soro supracelular, lysis celular, urina, saliva articular, líquido cerebrospinal, lavagem de folhas pulmonares, homogeneização de tecidos de vários tecidos; As formas de recolha e manipulação são diferentes. Abaixo estão listados os métodos de recolha, tratamento e conservação das amostras recolhidas em kits de ELISA.