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Para determinar se o anticorpo está desativado, o núcleo depende se ele se liga eficazmente ao antígeno ou desempenha um papel neutralizador. O método comumente usado é o teste de neutralização e o teste ELISA, uma função de teste direto, uma capacidade de combinação quantitativa.
Ensaio de neutralização: medição da atividade funcional
Teste de neutralização do vírus: mistura de anticorpos e vírus após a infecção das células, se a taxa de sobrevivência celular é alta, indica que os anticorpos neutralizaram o vírus e a atividade é normal.
Teste de neutralização de toxinas: por exemplo, teste anti-O, anticorpos e toxinas misturadas após a adição de glóbulos vermelhos, se os glóbulos vermelhos não se dissolverem, indica que os anticorpos neutralizaram as toxinas, a atividade não tem problemas.
Teste ELISA: capacidade de ligação quantitativa
Princípio: os anticorpos são adsorvidos no veículo de fase sólida, após a adição de anticorpos a serem testados, o grau de coloração e a quantidade de anticorpos estão relacionados com a coloração secundária através da marcação enzimática.
Passos:
A embalagem do antígeno é: fixar o antígeno na placa microporosa.
Adicionar anticorpos a testar: ligação ao antígeno.
Adicionar o marcador enzimático: ligação a anticorpos.
Reação de coloração: substrato, o grau de coloração reflete a quantidade de anticorpos.
Análise dos resultados: medir o valor de absorção de luz, comparando com a curva padrão, para avaliar a eficácia e a atividade dos anticorpos.
Outros métodos auxiliares
Imunohistoquímica (IHC): observar a combinação de anticorpos e antígenos teciduais para avaliar a especificidade.
Teste de reatividade cruzada: verificar se os anticorpos se ligam a antígenos não alvo para evitar falsos positivos.
IV. Atenção
Condições experimentais: temperatura, pH, etc. devem ser rigorosamente controlados para evitar afetar os resultados.
Conservação de anticorpos: Evite o congelamento repetido para evitar a perda de atividade.