Células endoteliais da artéria biliar humana

Células endoteliais da artéria biliar humana

Propriedades básicas das células:

Introdução das células: vesícula biliar,É uma estrutura de saco em forma de pêra localizada atrás do fígado sob a costela direita, com o efeito de concentrar e armazenar a bile. A parede da vesícula biliar é composta por três camadas: mucosa, músculosfera e membrana externa. As artérias são compostas por membranas endoteliais, medianas e externas, onde a membrana endotelial é composta principalmente de células endoteliais.

Mídio: sistema de cultura de células endoteliais originais

Frequência de troca: cada2-3 dias de troca de líquido

Liquido digestivo:0,25% de pâncreas

Condições de cultivo: fase gás: ar, 95%; CO2 ，5%

Métodos de cultura celular original:

Preparação: Tome vários produtos de cultura desinfetados e coloque-os na mesa de limpeza, desinfete com raios ultravioletas por 20 minutos. Lave as mãos antes de começar a trabalhar e limpe as mãos até o cotovelo com 75% de álcool.

2. layout: acender a luz de álcool, instalar o chapéu de chupa.

Tratamento do tecido: coloque o bloco de tecido em um copo e lave com o líquido Hanks 2 a 3 vezes para remover a mancha de sangue; Se suspeitar que o tecido possa estar contaminado, coloque-o em uma mistura azul por 30 a 60 minutos.

Corte: corte o tecido com os olhos em blocos de tamanho de 2 a 3 mm para facilitar a digestão. Adicione 30 a 50 vezes mais líquido do que o volume total de blocos de tecido, em seguida, coloque-o em uma garrafa triangular para amarrar a boca da garrafa ou encher com uma tampa de gel.

Digestão: ou com banho de água termostato, ou colocado em caixa de 37 ° C para a digestão, a digestão deve ser agitada a cada 20 minutos, como um agitador termostato eletromagnético para digerir melhor. O tempo de digestão depende do tamanho do bloco de tecido e da dureza do tecido.

Separação: durante o processo de digestão, quando o líquido digestivo é turbo, uma suína pode ser usada para aspirar um pouco de líquido digestivo sob o espelho, como o tecido foi disperso em grupos celulares ou células individuais, terminar imediatamente a digestão e, em seguida, filtrar os blocos de tecido que ainda não foram digeridos. Liquido digestivo centrífugo de baixa velocidade (500 ~ 1000 rotações / min) por 5 minutos, aspirar o soro superior e adicionar a quantidade apropriada de líquido de cultura contendo soro.

7. contagem: contagem com a placa de contagem, como a densidade de células de suspensão celular é muito grande, depois de adicionar o ajuste do líquido de cultura, dividido em garrafas de cultura. Para a maioria das células, o pH é necessário na faixa de 7,2 a 7,4, o líquido de cultura é ligeiramente vermelho, como a cor amarelada, indicando que o líquido está acidificado e pode ser ajustado com NaHCO3.

Cultura: colocado em uma cultura de caixa de temperatura de 36,5 ℃, como a cultura de caixa de temperatura de CO2, a tampa da garrafa deve ser soltada em meio círculo.

Atenção:

A cultura pode ser conservada por 3-6 meses sob condições de 4 ° C.

Durante a cultura celular, observe manter a operação estéril.

Durante o processo de cultura de transmissão, o tempo de digestão não deve ser muito longo, caso contrário, afetará a parede celular e seu estado de crescimento.

Recomenda-se que o cliente tire algumas fotos das células em cada multiplicador nos primeiros 3 dias após o recebimento das células, para registrar o estado das células e facilitar a comunicação com o departamento técnico; Por causa do transporte, as células sensíveis individuais podem ser instáveis, por favor, entre em contato conosco prontamente para informar detalhadamente sobre a situação específica das células, para que nossos técnicos possam rastrear e voltar até que o problema seja resolvido.

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