nome do produto ：Liquido de separação de linfocitos do sangue periférico humano

Especificações do produto ：200 ml

Condições de armazenamento::RT， Proteção da luz

Período de validade:12 meses

Descrição do produto:Este produto é um líquido de separação de gradiente de densidade estéril e com baixos níveis de endotoxinas para a separação de linfocitos do sangue periférico humano. Seu princípio de separação é baseado na diferença de densidade de glóbulos sanguíneos (a densidade de glóbulos vermelhos e fíbrios é1.090 g/mlà direita; Densidade de linfocitos e mononucleócitos1.075~1.090 g/mLAs plaquetas sanguíneas são1.030~1.035 g/mLPor meio da centrifugação, as células de certa densidade são distribuídas em um gradiente de densidade correspondente, isolando os linfocitos do sangue periférico ou do cordão umbilical humano.

Indicadores do produto:Densidade1.077±0,001g / mlPressão de penetração290~350 mOsm/kg H2Oestéril0.1μmFiltro de filme

Condições de conservação:Este produto é sensível à luz, deve ser armazenado à temperatura ambiente1 anos. Após a abertura estéril, mantê-lo a temperatura ambiente.

Passos operacionais:1. Sangue anticoagulante fresco (EDTACitrato de sódio ou hepatina anticoagulante) ou desfibroproteína de sangue, com o mesmo volume de sangue completo e diluição de tecidos ouPBSDiluir o sangue inteiro.2. Adicione a quantidade apropriada de separação no tubo centrífugo (quando diluído, o volume sanguíneo é menor do que3 mlQuando se juntar3 mlLiquido de separação; maior que igual3 mlAdicionar outros líquidos de separação de volume. Mas o volume total dos dois não pode exceder dois terços do tubo centrífugo, caso contrário, afetará o efeito de separação), diluir o sangue diluído acima da superfície do líquido de separação, prestando atenção para manter a interface das duas superfícies claras. (O sangue pode ser aspirado com uma aspiradora Pasteur e, em seguida, o sangue pode ser cuidadosamente colocado sobre o separador, porque a diferença de densidade entre os dois formará uma interface estratificada clara. Se as amostras forem extraídas por mais tempo, a sedimentação de glóbulos vermelhos é normal antes da centrifugação.)

3. Temperatura ambiente, rotor horizontal500~1000gCentrífuga.20 ~ 30 minutos(Quanto maior o volume do sangue, maior a força centrífuga necessária, a centrífugaQuanto mais tempo, as melhores condições de separação devem ser exploradas, a velocidade máxima de rotação da centrífuga não excede1200g）。4. Depois da centrifugação, aparecerá uma camada clara: a camada superior é a camada de plasma diluída, no meio é a camada transparente de separação, o plasma e a fração.A camada da membrana branca entre a separação é a camada de linfocitos, e a parte inferior do tubo centrífugo são os glóbulos vermelhos e os glóbulos fíbrios.5. Cuidado com as células da membrana branca15 mlno tubo centrífugo limpo,10ml de PBSOu líquido de lavagem celular para lavar as células da membrana branca.250gCentrífuga.10 minutos。6. Abandoná-lo,5 mldePBSou líquido de limpeza celular para ressuspender as células,250gCentrífuga.10 minutos。7. Repita os passos68. Eliminar e restabelecer as células.

Pureza de separação:Pureza de separação de linfocitos usando líquido de separação de linfocitos humanos é maior do que90%。

Atenção:Um.Antes de abrir, misture invertidamente, esta separação é um produto estéril, para prolongar o tempo de conservação da separação, abra em condições estériles para evitar a poluição microbiana.B. O que é?O líquido de separação deve ser mantido sempre a temperatura ambiente (18℃~25C), se a temperatura interior for baixa, o líquido de separação pode ser pré-aquecido.4A centrifugação em condições de temperatura mais baixa pode levar a um aumento da poluição de glóbulos vermelhos na camada da membrana branca.C. O que é?As amostras de sangue são preferivelmente anticoagulantes frescos (coleta de sangue)2 horasPara manter a atividade dos linfocitos, deve ser evitado o congelamento e refrigeração.D. O que é?Diluir sangue ou lavar células, não pode ser usado contendoCa、MgO tampão de íons e o líquido de cultura, cuja composição pode levar à coagulação de células sanguíneas, reduzindo significativamente a taxa de obtenção e pureza das células.E. É.Alguns produtos plásticos (como o poliestireno) por causa de seus efeitos eletrostáticos podem causar paredes celulares, afetando o efeito de separação.F. O que é?A viscosidade ou a diferença de temperatura das amostras de sangue podem afetar o efeito da separação, ajustando o número de rotações e o tempo de centrifugação para encontrar as melhores condições de separação.O G.A absorção excessiva de camadas de linfocitos e camadas de líquido de separação pode levar a que os fíbrios na intersecção do líquido de separação sejam aspirados, aumentando assim o número de fíbrios misturados; A absorção excessiva de camadas de plasma pode levar à contaminação das proteínas do plasma e das plaquetas nos linfocitos.O H.Se as células isoladas forem cultivadas ainda mais, preste atenção à operação estéril durante a coleta de sangue e a separação para evitar a contaminação microbiana.Eu...O coeficiente de separação celular e a carga celular em diferentes separações de sangue animal são diferentes, e o usuário deve fornecer a proporção de separação necessária, a espécie animal e o nome das células isoladas.