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Descentralizar o produto da PCR a temperatura ambiente por um dia ou dois não é um grande problema, mas não é a longo prazo. Se for deixado temporariamente por uma ou duas horas, não se preocupe, o DNA é estável e não se degrada.
No entanto, note que se a temperatura ambiente for prolongada (por exemplo, mais de 24 horas), a faixa pode começar a ficar borrosa e o risco de degradação aumentará gradualmente. Se a temperatura ambiente for alta, a degradação será mais rápida.
Armazenamento a curto prazo (por exemplo, dentro de um ou dois dias), colocar no frigorífico de 4 ° C, pode inibir eficazmente a atividade enzimática e manter-se estável. Para conservação a longo prazo (vários meses ou mais), deve ser congelado a -20 ° C ou -80 ° C, a prática padrão. Se as condições o permitirem, depois de ser purificado com um kit de ensaio especial e congelado, o efeito é melhor e pode evitar danos causados pelo congelamento repetido. Para prolongar ainda mais o tempo de conservação dos produtos de PCR, a estratégia de congelamento por parcela é recomendada. O produto é dividido em vários tubos EP estériles, cada um armazenando uma única quantidade, evitando o risco de ruptura de DNA resultante de congelação repetida. Ao dividir, deve prestar atenção à centrifugação curta da abertura do tubo para evitar que o resíduo de gotas cause poluição. Para amostras de alto valor, uma quantidade moderada de glicerina (concentração final de 5%-10%) pode ser adicionada ao tampão, o que reduz o dano físico ao DNA causado pela formação de cristais de gelo.
Se as condições de laboratório são limitadas, você pode usar o método de precipitação de etanol de sal para conservação temporária: adicionar 1/10 do volume de acetato de sódio 3M e 2,5 vezes o volume de etanol pré-refrigerado sem água, depois de misturar a -20 ° C. Este método, embora não seja tão estável quanto o congelamento profissional, pode manter a integridade do DNA por 1-2 semanas em situações súbitas como cortes de energia, quando usado, apenas deve ser descartado por centrifugação, depois de lavagem com etanol de 70%.
Vale a pena notar que os produtos que contêm marcas fluorescentes são sensíveis à luz e devem ser armazenados com tubos de proteção contra luz, mesmo em ambientes de 4 ° C, envolvidos com folha de alumínio. Para amostras que precisam ser transportadas internacionalmente, recomenda-se o uso de cartões de conservação estável de DNA, este papel de filtro especial do tamanho do portador de slides pode conservar o ácido nucleico durante meses a temperatura ambiente, especialmente adequado para cenários de amostragem em campo.
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